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      LN229 人胶质瘤细胞
      货号 :H179
      价格:¥2000.00
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      细胞名称

      LN229人胶质瘤细胞

      货号

      H179

      种属

      细胞来源

      从ATCC/中科院/协和医院等地引进

      生长特性

      贴壁 上皮样

      培养条件

      培养基:90%DMEM+10%FBS(推荐HAKATA优等胎牛血清,货号:HN-FBS-500)

      温度:37℃     气相 :95%空气,5%二氧化碳

      传代

      1.75%酒精喷洒整个培养瓶消毒 ,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲 ,.然后置于无菌操作台,打开瓶口 ,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养 ,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代 ,一般23天换一次液;

      2.待细胞长满瓶底面积80%-90% ,需要对其进行传代 ,传代比例为1:21:4 ;

      3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS ,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶 ,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察 ,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间 ,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化 。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清 ,加入完全培养基重悬细胞 ,进行传代。

      保存

      冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

      (备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用 。)

      保存条件:液氮存储

      供应限制

      经供研究之用

      常见问题及解决方案

      1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以尊龙凯时人生就是搏会及时安排帮老师解决。

      2.收到细胞后尽快更换新鲜培养基 。

      3.细胞漂浮 :培养瓶不开封 ,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代 ;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察 ,尊龙凯时人生就是搏的技术人员会一直跟踪指导 ,直到问题解决。


      公司简介 / Company profile
      上海尊龙凯时人生就是搏生物科技有限公司
      Shanghai Chuan Qiu Biotechnology Co.,Ltd.
             公司主要依托复旦大学、同济大学等上海地区多家著名高校,拥有一支富有经验的开发团队,专业从事细胞及细胞...
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