货号

M034

种属

小鼠

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

贴壁 神经元样和阿米巴干细胞样

培养条件

培养基：90%DMEM(L)+10%FBS(推荐HAKATA优等胎牛血清，货号:HN-FBS-500)

温度：37℃     气相
：95%空气，5%二氧化碳

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒


，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台




，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代
，一般2天换一次液；

2.待细胞长满瓶底面积80-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:2-1
：6
；

3传代步骤
：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37℃预热
，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS
，轻晃洗涤后弃去



。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶
，置于室温孵育消化（第一次消化需置于显微镜下观察

，以显微镜下细胞触角回收变圆


、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间


，记录最佳消化时间
，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化

。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞
，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1000rpm离心3min


，弃上清
，加入完全培养基重悬细胞
，进行传代
。

保存

冻存条件：50%完全培养基+40%FBS+10%DMSO

(备注
：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100）

，用4度保存的冷冻液直接重悬细胞

，不能预热后使用。)

保存条件

：液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂
，培养液有漏液

：细胞极大可能会污染
，所以尊龙凯时人生就是搏会及时安排帮老师解决

。

2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基。

3.细胞漂浮
：培养瓶不开封
，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱


。1-2小时后观察

，如细胞大部分又贴回瓶底
，表明细胞活力正常
，剩余漂浮的细胞可以去掉

，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁

，将细胞离心收集转到新培养瓶



，原培养瓶加部分培养液继续培养


，中间注意观察
，尊龙凯时人生就是搏的技术人员会一直跟踪指导


，直到问题解决


。