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Raw264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
货号 :M003
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细胞名称

Raw264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

货号

M003

种属

小鼠

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

贴壁 单核细胞样

培养条件

培养基:90% DMEM  +10% FBS

温度    :37℃     气相 :95%空气  ,5%二氧化碳

传代

1.75%酒精喷洒整个培养瓶消毒 ,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台 ,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养 ,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代 ;

2.待细胞长满瓶底面积70%   ,已有部分细胞开始堆叠时 ,需要对其进行传代   ,传代比例为1:31 :6 ;

3传代步骤:去掉旧培养基后 ,使用细胞刮将细胞刮下        ,再加入培养基重悬传代  。或去掉旧培养基后,加入冷PBS或培养基对细胞进行吹打将其从瓶底分离 。吹打次数不宜过多 ,以免造成细胞损伤         。若悬浮细胞较多,可直接用旧培养基吹打细胞,吹打完成后吸出培养基,1000r/min离心5min,去上清后加入新鲜培养基重悬传代     。

保存

冻存条件 :80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

(备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100) ,4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用   。)

保存条件  :液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂,培养液有漏液  :细胞极大可能会污染   ,所以尊龙凯时人生就是搏会及时安排帮老师解决  。

2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基  ,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时)

3.细胞漂浮  :培养瓶不开封 ,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察  ,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉 ,留8-10ml培养液培养观察 ,细胞生长至汇合度80% ,进行消化传代;如细胞还是不贴壁  ,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养 ,中间注意观察,尊龙凯时人生就是搏的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

  

 

 


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