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GH3 大鼠垂体瘤细胞
货号 :R009
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细胞名称

GH3 大鼠垂体瘤细胞

货号

R009

种属

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

疏松贴壁,有漂浮的细胞簇 上皮样

培养条件

培养基:F-12K+2.5%FBS (推荐HAKATA优等胎牛血清  ,货号:HN-FBS-500+15%HS(推荐HAKATA马血清,货号:HM-FBS-500)

温度       :37℃     气相:95%空气   ,5%二氧化碳

传代

1.75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲 ,.然后置于无菌操作台,打开瓶口  ,将培养基吸出 ,1000r/min离心5min去上清 ,再往其中加入5-6mL新鲜培养基,吹打均匀后,转移至原培养瓶并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代 ,一般2天换一次液   ;

2.待细胞长满瓶底面积70-80% ,需要对其进行传代 ,传代比例为1:2-1:4;

3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37预热 ,吸出培养基至离心管 ,往培养瓶中加入1-2 ml PBS  ,轻晃洗涤PBS转移至离心管     。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于室温孵育消化(第一次消化需置于显微镜下观察 ,以显微镜下细胞触角回收变圆 、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间 ,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化 。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞  ,使之完全脱落,然后收集细胞悬液至离心管,1000rpm离心5min ,弃上清  ,加入完全培养基重悬细胞,进行传代 。

保存

冻存条件   :70%完全培养基+20%FBS+10%DMSO

(备注 :建议使用本公司的冷冻液(H-W-100)    ,4度保存的冷冻液直接重悬细胞  ,不能预热后使用。)

保存条件  :液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂   ,培养液有漏液    :细胞极大可能会污染 ,所以尊龙凯时人生就是搏会及时安排帮老师解决   。

2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基 。

3.注意该细胞为轻微贴壁,且有较多细胞悬浮 ,需要通过离心的方式收集悬浮细胞再传代换液 。


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