细胞名称 | GH3 大鼠垂体瘤细胞 |
货号 | R009 |
种属 | 大鼠 |
细胞来源 | ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
生长特性 | 疏松贴壁,有漂浮的细胞簇 上皮样 |
培养条件 | 培养基:F-12K+2.5%FBS (推荐HAKATA优等胎牛血清,货号:HN-FBS-500)+15%HS(推荐HAKATA马血清,货号:HM-FBS-500) 温度:37℃ 气相:95%空气,5%二氧化碳 |
传代 | 1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将培养基吸出,1000r/min离心5min去上清,再往其中加入5-6mL新鲜培养基,吹打均匀后,转移至原培养瓶并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2天换一次液; 2.待细胞长满瓶底面积70-80%,需要对其进行传代,传代比例为1:2-1:4; 3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37℃预热,吸出培养基至离心管,往培养瓶中加入1-2 ml PBS,轻晃洗涤将PBS转移至离心管。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于室温孵育消化(第一次消化需置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液至离心管,1000rpm离心5min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。 |
保存 | 冻存条件:70%完全培养基+20%FBS+10%DMSO (备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。) 保存条件:液氮存储 |
供应限制 | 仅供研究之用 |
常见问题及解决方案 | 1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以尊龙凯时人生就是搏会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基。 3.注意该细胞为轻微贴壁,且有较多细胞悬浮,需要通过离心的方式收集悬浮细胞再传代换液。 |