货号

R008

种属

大鼠

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

贴壁 上皮样

培养条件

培养基：90%DMEM(H)+10% FBS(推荐HAKATA优等胎牛血清



，货号:HN-FBS-50）

温度：37℃     气相：95%空气，5%二氧化碳

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲

，.然后置于无菌操作台
，打开瓶口
，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养

，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代
，一般2天换一次液

；

2.待细胞长满瓶底面积70-80%



，需要对其进行传代

，传代比例为1:2-1



：3

；

3传代步骤

：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37℃预热

，倒掉培养瓶中的培养基
，往培养瓶中加入3-5 ml PBS
，轻晃洗涤后弃去
。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶




，置于室温孵育消化（第一次消化需置于显微镜下观察


，以显微镜下细胞触角回收变圆
、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间



，以便于下次消化）
，消化好后加入3ml完全培养基终止消化

。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落
，然后收集细胞悬液，1000rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代

。

保存

冻存条件：70%完全培养基+20%FBS+10%DMSO

(备注：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100）


，用4度保存的冷冻液直接重悬细胞
，不能预热后使用

。)

保存条件
：液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂

，培养液有漏液
：细胞极大可能会污染
，所以尊龙凯时人生就是搏会及时安排帮老师解决
。

2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基
。

3.细胞漂浮：培养瓶不开封


，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱
。1-2小时后观察

，如细胞大部分又贴回瓶底


，表明细胞活力正常

，剩余漂浮的细胞可以去掉
，换8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代



；如细胞还是不贴壁
，将细胞离心收集转到新培养瓶
，原培养瓶加新培养液继续培养


，中间注意观察，尊龙凯时人生就是搏的技术人员会一直跟踪指导



，直到问题解决
。