货号

R007

种属

大鼠

细胞来源

ATCC

生长特性

贴壁 多角形

培养条件

培养基：90%RPMI-1640+10% FBS+0.05mM 2-巯基乙醇+0.11g/L 丙酮酸钠(推荐HAKATA优等胎牛血清，货号:HN-FBS-50）

温度

：37℃     气相


：95%空气，5%二氧化碳

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒
，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台

，打开瓶口

，将其中的培养液去掉

，再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养



，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代


，一般2天换一次液

；

2.待细胞长满瓶底面积70-80%


，需要对其进行传代，传代比例为1:2-1：4



；

3传代步骤

：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37℃预热

，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于室温孵育消化（第一次消化需置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆
、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间


，记录最佳消化时间，以便于下次消化）







，消化好后加入3ml完全培养基终止消化
。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞
，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1000rpm离心3min，弃上清





，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。

保存

冻存条件
：70%完全培养基+20%FBS+10%DMSO

(备注

：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100）

，用4度保存的冷冻液直接重悬细胞
，不能预热后使用。)

保存条件：液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂
，培养液有漏液：细胞极大可能会污染


，所以尊龙凯时人生就是搏会及时安排帮老师解决
。

2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基

3.细胞漂浮：培养瓶不开封
，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察

，如细胞大部分又贴回瓶底

，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉


，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%

，进行消化传代

；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养
，中间注意观察
，尊龙凯时人生就是搏的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。