货号

C010

种属

猪

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

贴壁 巨噬细胞样

培养条件

培养基
：90%RPMI-1640+10%FBS+0.1mM NEAA+1mM丙酮酸钠+10mM Hepes（推荐HAKATA优等胎牛血清，货号:HN-FBS-500）

温度：37℃     气相
：95%空气
，5%二氧化碳

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒
，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口

，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养
，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代





，一般2到3天换一次液


；

2.待细胞长至80%时


，需要对其进行传代
，推荐传代比例为1:2至1:4

；

3传代步骤
：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基
，往培养瓶中加入3-5 ml PBS

，轻晃洗涤后弃去
。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆
、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间
，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化


。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞

，使之完全脱落



，然后收集细胞悬液，125g离心3min
，弃上清
，加入完全培养基重悬细胞

，进行传代










。

保存

冻存条件：40%完全培养基+50%FBS+10%DMSO

(备注
：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100）
，用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用

。)

保存条件：液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂，培养液有漏液
：细胞极大可能会污染
，所以尊龙凯时人生就是搏会及时安排帮老师解决

。

2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基

3.细胞漂浮




：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察
，如细胞大部分又贴回瓶底
，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉





，留8-10ml培养液培养观察
，细胞生长至汇合度80%

，进行消化传代





；如细胞还是不贴壁
，将细胞离心收集转到新培养瓶
，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察
，尊龙凯时人生就是搏的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。