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L02 人正常肝细胞 (通过STR鉴定)
货号  :H024
价格   :¥2000.00
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细胞名称

L-02(HL7702)人正常细胞

货号

H024

种属

细胞来源

从ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

贴壁 上皮样

培养条件

培养基 :80%RPMI-1640+20%FBS

温度:37℃     气相 :95%空气 ,5%二氧化碳

传代

1.75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲   ,.然后置于无菌操作台 ,打开瓶口 ,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养 ,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般23天换一次液 ;

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%   ,需要对其进行传代 ,传代比例为1:31:6  ;

3传代步骤         :将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热  ,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶 ,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察  ,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间 ,记录最佳消化时间 ,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化 。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞 ,使之完全脱落 ,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清 ,加入完全培养基重悬细胞,进行传代  。

保存

冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

(备注 :建议使用本公司的冷冻液(H-W-100) ,4度保存的冷冻液直接重悬细胞 ,不能预热后使用 。)

保存条件   :液氮存储

供应限制

经供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂 ,培养液有漏液:细胞极大可能会污染 ,所以尊龙凯时人生就是搏会及时安排帮老师解决 。

2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基  ,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基 ,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时)

3.细胞漂浮 :培养瓶不开封  ,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱   。1-2小时后观察 ,如细胞大部分又贴回瓶底 ,表明细胞活力正常    ,剩余漂浮的细胞可以去掉 ,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80% ,进行消化传代  ;如细胞还是不贴壁 ,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察 ,尊龙凯时人生就是搏的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

 


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上海尊龙凯时人生就是搏生物科技有限公司
Shanghai Chuan Qiu Biotechnology Co.,Ltd.
       公司主要依托复旦大学 、同济大学等上海地区多家著名高校,拥有一支富有经验的开发团队 ,专业从事细胞及细胞...
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