细胞的冻存
1.先将冻存管放入4℃冰箱,约40min。
2.接着置于-20℃冰箱,约30-60min。
3.置于-80超低温冰箱中放置过夜。
4.置于液氮罐中长期保存。
5同时做好冻存记录,在自己的笔记本和冻存记录本上均要记录。
注意事项:
1.使用DMSO前,不需要进行高压灭菌,它本身就有灭菌的作用。高压灭菌反而会破华它的分子结构,以至于降低冷冻保护效果。在常温下,DMSO对人体有害,故在配制时最好戴上手套操作。
2.不宜将冻存细胞放置在0℃~-60℃这一温度范围内过久,低温损伤主要发生在这一温度区内,是“危险温区”。
3.注意定期检查液氮罐内液氮量,及时添加。