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为什么我的细胞冻存过后复苏挂掉 ?

细胞冻存之后复苏挂掉  ,小秋认为有几种可能的解释 :

1)细胞因未妥善储存而死亡(液氮容器存在问题 ,细胞冻存液存在问题等)  。

2)介质中缺少一些添加剂。例如  ,您是否添加了双倍量的胎牛血清 ?您的细胞是否需要任何不常用的特殊添加剂 ?

3)为了复活  ,细胞的密度太低 。为避免这种情况  ,请使用较小的烧瓶/平板 。

如果你能提供一些你想要复活的细胞类型的细节 ,那将是很有用的。我的答案是指常见的哺乳动物细胞培养物  ,但如果你正在研究细菌     ,昆虫细胞等,还有其他可能的解释 。

除上述要点外:

你可能过快地将细胞冻存 - 直接在液氮中(极不可能  ,但可能)。理想情况下,你应该将它们在含有异丙醇的冷冻箱中在-80℃下冷冻过夜,然后转移到液氮中 。

或者你把它们解冻太慢。与流行的看法相反,你必须在室温下解冻细胞保存细胞1分钟,然后在水浴中孵育    ,直到你看到冷冻介质变成液体。不要在冰上融化  。

此外  ,当冷冻保存时   ,重要的是细胞具有高活力   ,并且处于指数生长期 ,而不是处于平台期  。

 

还有更多的可能  ,是你没有使用HAKATA无血清细胞冻存液     !

细胞冻存液

这是一款无血清即用型细胞冻存,最大的特点就是无需程序降温盒及稀释,无需分步降温,直接使用!

可在 - 80℃长期保存细胞 、肿瘤细胞和常规细胞 。冷冻细胞时,用HAKATA细胞冻存液悬浮处于对数生长期的细胞 ,不需预冷 ,直接- 80℃冷冻保存,也可用液氮快速冷冻细胞  ; 

复苏时用恒温箱或者水浴锅快速复苏细胞即可 。不仅操作方便  ,更能提供稳定的冻存效果 ,获得更好的细胞活力。


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