尊龙凯时人生就是搏



      申请试用装
      您当前的位置:首页 > 最新动态 > 公司新闻
      小秋分享:细胞培养时注意事项(下)

      收到冻存细胞后如何处理?
      1 、首先,收到细胞时,请检查泡沫箱内干冰是否剩余、细胞冻存管是否有解冻情况 ,若出现细胞解冻情况 ,请拍照 ,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为售后服务依据);若细胞冻存管正常,细胞株请尽速开始培养或立即冻存保存(置于-80℃冰箱,隔夜放置后,移至液氮罐中保存) ,需要时,复苏培养即可 。
      2、准备好37℃水浴锅,并准备好细胞完全培养基(温育至37℃);
      3、在15ml离心管中加入9ml细胞完全培养基(温育至37℃);
      4、将装有冻存细胞的冻存管从液氮罐中取出,立即放入37℃水浴中 ;
      5、在37℃水浴中快速晃动细胞冻存管,使得冻存管中内容物尽快融化;仔细观察 ,待冻存管中内容物完全融化后取出;注意:①尽可能避免水没过管帽,以减少污染的风险 ;②要快速完成细胞复苏过程(尽量控制在1分钟内) ,融化过程时间过长 ,会造成复苏后细胞活性较差。
      6、用70%75%酒精消毒冻存管外壁,在超净台中打开冻存管 ,用吸管/移液器将细胞冻存悬液移入装有9ml细胞完全培养基的15ml离心管中(在这一过程请尽可能避免产生气泡)。
      7、为了减少细胞损失,往细胞冻存管中加入1ml完全培养基,稍微吹打,用吸管/移液器将这1ml的细胞悬液吸入离心管中,再用吸管/移液器将离心管中的细胞轻轻吹打混匀 。
      8 、以250×g的离心力(约1200-1350rpm)将细胞悬液离心3-5分钟。
      9 、离心后 ,检查上清液是否清澈 ,有无完整的细胞沉淀;在超净台内,尽量去除上清液,向细胞沉淀物加入1-2ml的完全培养基(温育至37℃),轻轻吹打混匀。
      10 、将细胞全部接种至1T25细胞培养瓶或60mm无菌塑料培养皿中,加入6-8ml细胞完全培养基 ;轻轻摇晃细胞培养器皿,使细胞均匀分布 。
      11、置于37℃、5%CO2 、饱和湿度的恒温培养箱中静置培养 。
      12、之后 ,参照细胞说明书换液频率给细胞换新鲜的完全培养基(温育至37℃),直到细胞达80%的汇合度;当细胞达80%-90%的汇合度,可参照细胞说明书传代比例进行消化、传代。
      上海尊龙凯时人生就是搏生物一贯秉承以 :诚信、创新、严谨 、专业,为动力,不断提高创新能力 、服务能力,您身边科研试剂最佳选择!主营产品如下:
      HAKATA胎牛血清
      HAKATA干细胞专用血清
      HAKATA无外泌体血清
      HAKATA人间充质干细胞无血清培养基
      HAKATA无血清细胞冻存液
      HAKATA超敏ECL发光液试剂盒
      HAKATA ELISA 试剂盒
      HAKATA感受态细胞 
      细胞株/系、iPS细胞、原代细胞

      公司简介 / Company profile
      上海尊龙凯时人生就是搏生物科技有限公司
      Shanghai Chuan Qiu Biotechnology Co.,Ltd.
             公司主要依托复旦大学 、同济大学等上海地区多家著名高校 ,拥有一支富有经验的开发团队,专业从事细胞及细胞...
      联系尊龙凯时人生就是搏 / Contact
      电 话 :021-69950217  173-2144-0983
      传 真:021-69950218
      邮 箱 :2078251929@qq.com
      邮 编 :201800
      地 址:上海市嘉定区翔江公路518号寅尚产业园D座210室
      Copyright © 2018 CHUANQIU Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved. 沪ICP备18030131号-1
    1. 申请试用装
    2. 021-69950217



      1. XML地图