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细胞培养中培养基的作用
1.液体培养基贮存于4℃ 冰箱   ,避免光照  ,实验进行前放在37℃ 水槽中温热   。0S'、

2.液体培养基(加血清)存放期为六个月  ,期间glutamine可能会分解,若细胞生长不佳
可以再添加适量glutamine    。
3.粉末培养基配制(以1升为例):
3.1.细胞培养基通常须添加10%血清   ,因此粉末培养基之配制体积为900ml  ,pH为7.2-7.4。NaHCO3为另外添加  ,若将NaHCO3粉末直接加入液体培养基中会造成pH之误差,或局部过碱。因此粉末培养基及NaHCO3粉末应分别溶解后才混合  ,然后用CO2气体调整pH   ,而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH) ,因为氯离子对细胞生长可能有影响 ,且贮存时培养基的pH易发生改变   。生物3.2.材料   :纯水(milli-Q水或二次至三次蒸馏水,水品质非常重要)  ,粉末培养基,NaHCO3
电磁搅拌器,无菌血清瓶,0.1或0.2mm无菌过滤膜,pH计  ,真空泵 ,CO2气体。
3.3.步骤:
3.3.1.取粉末培养基溶于700mlmilli-Q水中,搅拌使其溶解。
3.3.2.称取适量之NaHCO3粉末溶于200mlmilli-Q水中    ,搅拌使其溶解,然后通入CO2气体至饱和,约3-5分钟。
3.3.3.将溶解且含饱和CO2之NaHCO3溶液加入溶解之液体培养基中混合。混后溶液之pH应为7.2-7.4 ,除非pH值偏差太大 ,否则不需用酸碱再调整之 。若为太碱,可再通入CO2气体调整pH 。培养基以真空帮浦通过过滤膜时,pH会升高0.1-0.2 。
3.3.4.以0.1或0.2mm无菌过滤膜过滤灭菌 ,同时分装至无菌容器中  ,标示培养基种类 、日期    、瓶号等 ,贮存于4℃     。(血清亦可加入培养基中一起过滤)
3.3.5.配制之培养基配制须作生长试验与污染测试。

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Shanghai Chuan Qiu Biotechnology Co.,Ltd.
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