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胎牛血清(FBS)知多少

胎牛血清

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知 ,但还有一部分尚不清楚    ,且血清组成及含量常随供血动物的性别   、年龄     、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物  、生长因子、激素 、无机物等  ,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。

胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是品质最高的 ,因为胎牛还未接触外界  ,血清中所含的抗体     、补体等对细胞有害的成分最少 。

胎牛血清要求 :

1 、性状 、外观  :浅黄色澄清  、无溶血、无异物稍粘稠液体   。

2、蛋白质含量       :3.5%~5.0%( w/v)

3 、血红蛋白含量:≤ 0.02%( w/v)

4      、无菌检验   :阴性

5 、支原体检验:阴性

6、细菌内毒素   :≤5(EU/ml)

7、牛腹泻病毒:阴性

8 、大肠杆菌噬菌体 :阴性

9、支持细胞增殖 :(Sp2/0-Ag14) 生长曲线 (接种浓度)最大增殖浓度 ≥2.5×106个/ml  ,细胞倍增时间 :≤15h ,克隆率:≥85%

胎牛血清功能

牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成份 ,常用于动物细胞的体外培养  ,具有极为重要的功能。

1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物 。

2. 提供结合蛋白 ,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力  。

3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合 ,起到解毒作用。

4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源 。

5.起酸碱度缓冲液作用。

6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。

胎牛血清的评估标准

是最常用的血清添加剂,因为它富含生长因子   、蛋白和大分子  。尽管无血清和非动物来源的培养基也逐渐走红 ,但许多细胞系未必适用   ,并且存在费用较高和生长较慢等缺点 。那么 ,研究人员在评估FBS的质量时,需要考虑哪些标准呢   ?

对于细胞培养而言 ,血清的重要性不言而喻 。它含有蛋白、生长因子、氨基酸、脂类 、碳水化合物  、维生素及其他组分   ,可以促进贴壁或悬浮细胞的生长和维持 。胎牛血清(FBS)是最常用的血清添加剂,因为它富含生长因子 、蛋白和大分子。尽管无血清和非动物来源的培养基也逐渐走红   ,但许多细胞系未必适用,并且存在费用较高和生长较慢等缺点 。

目前  ,市场上存在着不同等级的FBS 。由于FBS关乎细胞活力和实验重复性等重要的参数,故在质量方面是绝对不能含糊的  。若质量不稳定,则有可能导致实验失败  。那么  ,研究人员在评估FBS的质量时         ,需要考虑哪些标准呢?

1.可追溯性

对于科学家而言 ,最大的风险也许是FBS的纯度大打折扣,这可能导致细胞培养实验的效果不佳 。许多FBS的卖家与多个产地签订短期供应协议来采集原材料,以便降低成本 。他们将这些产品混合 ,稀释不同来源的影响 。然而  ,最终结果就是质量不稳定 ,产品供应和价格出现波动  。

针对这一问题,国际血清行业协会(ISIA)实施了供应链可追溯性的行业标准,这对确保FBS各个批次的质量、安全性和重复性起了关键作用。一些公司提供化学分析,说明原产国的统计概率  。也许最好的方法是追溯到动物 ,以确保产品的来源 。

FBS的供应商是否在整个供应链中都保留原产地的可追溯记录  ?他们是否持有文件,支持各个阶段的处理、运输和商业交易?他们能否展示独特来源的可追溯性  ,以确保重复性和低病毒风险    ?在考虑购买FBS时  ,这都是你需要考虑的问题  。

地域性风险评估(GBR)是定性评估一个国家或地区的动物感染疾病(如疯牛病)的可能性 。这种方法依赖世界动物卫生组织(OIE)的监控系统 ,将每个国家或地区的疯牛病风险进行分类 。OIE评估各个国家的兽医服务、疾病诊断能力、觉察症状能力及其他因素,以避免疯牛病的传播。

新西兰和澳大利亚都获得了GBR 1级   ,这意味着它们目前是没有疯牛病和口蹄疫的。这两个国家都是出了名的病毒风险最低的国家    。由于环境受到保护,以及严格的农业法规和入境要求,再加上它们都是岛国 ,动物们不太可能受到其他地区疾病的影响。这对于那些敏感的细胞系和实验而言特别有用。对科学家来说      ,好处是花在重复实验或检验新批次上的时间将大大减少。

2.质量

对血清而言 ,产品质量尤为关键     。由美国食品和药品管理局(FDA)执行的cGMP规范建立了完整体系      ,以确保制造过程和工厂的正确设计、监控和控制 。在购买血清时 ,你最好选择遵从cGMP规范的供应商  ,以便降低产品混合和标签错误的风险  。

确保各批次一致性还涉及其他因素 ,包括牛群环境、食物来源以及质量控制检测程序   。正确采集血清,才能保证它天然的促进生长特性 ,并实现FBS产品的出色表现 。当然 ,这些资料收集起来可不容易,那么你可以依靠国际公认机构(如FDA、USDA  、AQIS等行业协会)的认证,来寻找理想的供应商。

3.价格

有时,FBS的价格会大幅波动,这取决于许多因素 。作为肉类行业的副产品,FBS的生产在本质上会受到天气和食物供应 、经济条件和牛群规模等各种因素的影响  。如果病毒不定期再来捣乱一下       ,那么牛的数量必然下降 ,FBS的供应也势必减少。此外    ,由于干旱导致奶牛饲养费用较高 ,农民可能会将牛卖掉或屠宰  ,导致牛群数量下降    。

值得一提的是,全世界对FBS的需求还在不断增加 。每年 ,全球大约生产600,000 L的FBS,其中cGMP等级的不足200,000 L,而后者正是大多数工业生产公司的要求 。随着大型制药公司的需求上升  ,FBS的价格也在持续上涨。此时 ,找到一家可以提供同批次FBS的供应商是十分必要的,这既确保了产品供应    ,也在一定程度上避免价格波动。

4.检测

定期的产品检测当然也不能少。大家应注意产品的供应商是否定期进行生化     、激素  、病毒和功能方面的检测,包括检测细菌 、病毒及其他微生物是否存在    ,以确保产品经过全面鉴定。质量控制检测也应当开展,以确保血清产品始终符合规定并合乎规格。

总的来说,FBS及其他血清有可能大大影响细胞培养工作的质量和重复性。因此   ,在购买过程中,尊龙凯时人生就是搏有必要对FBS的身世     、质量以及质检过程做到心中有数 ,而不仅仅被价格所左右 ,这样才能改善实验结果,节省宝贵时间


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